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大赛璐多糖正相涂敷型手性柱CHIRALPAK AD-H使用注意事项

本文提到的手性柱均为涂敷型 ,所以很多溶剂都会对色谱填料造成不可逆的损伤。凡是说明书中没有提到的溶剂流动相,请不要使用。通常情况下,用正己烷,乙醇和异丙醇为流动相;te殊情况下,可以用到甲醇和乙腈,但是需要充分过渡仪器和手性柱,同时严格控制流动相的混合比例。各手性柱对甲醇乙腈的比例要求不同,请参阅各自的英文版说明书。正相手性柱不能使用水作为流动相, 也不能用水溶解样品。否则柱子也会受到损伤。

大赛璐手性柱zui大耐压为30Mpa (300Bar)。为了延长手性柱的使用寿命,建议使用压力如下:

粒径10um手性柱:建议8Mpa下使用;粒径5um手性柱:建议在10Mpa下使用;粒径3um手性柱:建议在15Mpa下使用

流动相的成分、比例不同,则粘度不同,更换流动相时,需要相应地调整流速,以防止柱压过高。 在使用前yi定要che底清洗仪器管路、正确选择流动相。

1.使用前(在连接该手性柱进行实验前,请按以下步骤操作):

1.1确认仪器各部件状态:校准各泵的流速看是否准确。

1.2使用溶剂及配制:使用的有机溶剂(流动相)均为色谱级。配制流动相时,请充分振荡混合均匀,并且超声排除气泡。

1.3 样品的配制:样品一般是溶解于流动相中进样。个别情况下,也可以是正己烷和异丙醇(或乙醇)的等量混合溶剂中。如果使用非流动相溶解样品,需要特别注意会出现样品结晶析出的可能,一般表现为柱压升高,峰型不对称等。一般不能使用100的甲醇或Z腈溶解样品。其它不能用作流动相的溶剂同样不能用于溶解样品。若样品为油状物,请在配样前确认样品里没有残留对柱子有损伤性的有机溶剂,例如乙酸z酯、二氯甲烷、三lvjia烷四氢呋喃和甲基叔丁基醚等。样品不能溶解在水中。

1.4溶剂切换:请在连接色谱柱前,做好溶剂切换,根据HPLC系统中不同的当前流动相,采用不同的冲洗方法清洗所有管路:包括所有溶剂入口、泵、进样管路与装置和其他连接管路(用=通代替色谱柱连接流路冲洗色谱系统),如果当前流动相是水相流动相(如水乙腈、缓冲液/甲醇),要先用纯水che底冲洗(约60mL ),以除去其中存在的有机溶剂或缓冲液,然后用100的异丙醇或乙醇che底冲洗(约60 mL)以置换掉纯水。接下来,用流动相(通常是正己烷,异丙醇和乙醇;约30mL )冲洗仪器的整个

管路,以置换掉醇。最后连接上手性柱。如果当前系统是非水流动相(如烷烃类,异丙醇或Z醇),则可以直接用流动相(通常是正己烷,异丙醇和乙醇),冲洗仪器30mL,然后可以接上柱子。如果当前系统的流动相中含有一些会破坏正相柱的溶剂,如2酸乙酯,二氯甲烷和四氢呋喃等等),则需要用100的异丙醇或2醇(约60mL )冲洗仪器的所有管路,以置换掉对柱子有损伤性的溶剂;然后用实验所需的流动相(通常是正己烷,异丙醇和乙醇;约30mL)过渡仪器。最后连接上手性柱。刚接上手性柱时,不要突然升高至zui大流速,建议先小流速冲洗柱子,再逐渐升高到实验所需的zui适合流速。注意:对于管路比较多的HPLC仪器,建议其余未用的流路也bi须按照此步骤依次过渡,以免误操作时让其他溶剂进入系统,造成严重后果。若实验所需的流动相不是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇,而是其它流动相,请使用前仔细查看说明书或与我们确认。不同的流动相,过渡仪器的步骤不同。如果在连接手性柱至HPLC仪器之前,不严格按照本说明冲洗置换HPLC仪器系统的溶剂,色谱柱有可能在*次进样之前就被破坏,-般表现为柱压偏高,柱效严重下降:样品甚至没有保留,不能被分离等等。

2. 使用中:推荐使用保护柱。

3. 使用后:实验结束后,根据使用的流动相体系,确认是否需要采用溶剂过渡色谱柱,然后按照说明书的保存方法,将色谱柱密封保存。

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