凝胶色谱柱的应用越来越广泛,使用过后正确地对色谱柱进行保养才能使它的使用寿命更长jiu。那么,凝胶色谱柱应该如何进行清洗和保存呢?下面来简单介绍一下。
1.冲洗
凝胶色谱的流动相一半多采用水或缓冲溶液,少数采用水与一些极性有机溶剂的混合溶液,除此之外,还有个别比较te殊的流动相系统,这要根据溶液分子的性质来决定。加完样品后,可将色谱床与洗脱液贮瓶及收集器相连,设置好一个适宜的流速,就可以定量地分布收 集洗脱液。然后根据溶质 分子的性质选择光学、化学或生物学的方法进行定性和定量测定。
2.再生
因为在凝胶色谱中凝胶与溶质分子之间原则上不会发生任何作用,因此在一次分离后用流动相稍加平衡就可以进行下一次的色谱操作。但在实际应用中常有yi定的污染物污染凝胶。对 已沉积于凝 胶床表面的不溶物可把表层凝胶曲调, 在适当增补一些新的溶涨胶,并进行重新 平衡处理;如果整个柱有微量污染,LINaCI 溶液洗脱。在通常情况下,一根凝胶柱可使用半 年之久。凝胶柱若经多次使用后,其色泽改变,流速降低,表面有污渍等就要对凝胶进行再生处理。凝胶的再生是指用恰当的方法除去凝胶中的污染物,使其恢复其原来的性质。交联葡萄糖凝 胶厂用温热的 L 氢氧化钠和 L 的氯化钠和混合液浸泡,用水冲洗到中性;而对于聚丙烯酰胺和 琼脂糖凝胶由于遇酸碱不稳定,则常用盐溶液浸泡,然后用水冲到中性。
3.保存
经常使用的凝胶以湿态保存为主,为了避免凝胶床染菌,可加少许氯仿、苯*或硝基苯等化学物质,它可以使色谱柱放置几个月至一年。凝胶的干燥应先对凝胶进行浮选,除去细小的 颗粒,并用 大量水洗,除去盐和污染物,然后逐步增加一春浓度使凝胶收缩, 燥,在整个操作过程中的蒸馏水、器皿和房间bi须干净 。琼脂糖凝胶的干燥操作比较麻烦, 并且干燥后还 在 60~80 度干不容易溶张,所以一般仍以湿态保存为主。